產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號(hào) |
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人(rén)副(fù)流感(gǎn)病毒通(tōng)用PCR檢測試劑盒 |
Human Parainfluenza Virus(HPIV)RTPCR |
YS-P014313 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當的儲存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
人副(fù)流感(gǎn)病毒通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以指數(shù)方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反應液加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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