產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
|
傳染(rǎn)性(xìng)支氣管炎(yán)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Infectious Bronchitis Virus(IBV)RTPCR |
YS-P014327 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一(yī)次，若復核結果Ct<40且有指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
傳染性支氣管(guǎn)炎病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大大增加(jiā)，被擴增的靶基因片段也就能保(bǎo)持很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特異性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
