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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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唾液(yè)乳(rǔ)酸杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Lactobacillus salivariusPCR |
YS-P014357 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結果應為陽性，有明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則判定(dìng)為陽性，否則(zé)判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
唾液乳酸杆(gān)菌PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確(què)結合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異性大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區，其特異性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用同位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低(dī)
不需要分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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