產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
| 耶爾(ěr)森(sēn)菌通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Yersinia spp.PCR |
YS-P014938 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑一般要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結(jié)果應為陽性，有明(míng)顯的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性。
耶(yé)爾森菌通用PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中模板與引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳分析，不一(yī)定要(yào)用同位素，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
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