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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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跳躍病(bìng)病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Louping Ill VirusRTPCR |
YS-P014382 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一(yī)般為1年，這是指在適當的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則該次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
跳(tiào)躍(yuè)病(bìng)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結合及引物(wù)鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通過選擇特異性和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū)，其特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量是以指數方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要分離病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
