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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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馬(mǎ)秋博病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Machupo Virus(MACV)RTPCR |
YS-P014387 |
分類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反復凍融。
運輸:低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨期(qī):現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一(yī)般(bān)為1年,這是指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾值(zhí)綫設定在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應(yīng)為陽性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小於等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿足,否則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn);對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次,若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染,試(shì)劑汙(wū)染,樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能下降,可能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
②鹼基配對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守性。
馬秋博(bó)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng),結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加(jiā),被(bèi)擴增的靶基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞;在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液加(jiā)好後,即在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應,一(yī)般在2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要用同位(wèi)素,無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液(yè),毛(máo)發,細(xì)胞,活(huó)PCR技術(shù)概論。
