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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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羅氏沼蝦諾達(dá)病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus(MrNV)RTPCR |
YS-P014388 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年，這(zhè)是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次實驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
羅氏(shì)沼(zhǎo)蝦諾(nuò)達(dá)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與引物的結合(復性)可以在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能保持很高的正確度(dù)。再通(tōng)過選擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板。可直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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