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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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巨球(qiú)菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Macrococcus spp.PCR |
YS-P014389 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢測結果應為陽性，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配製(zhì)不(bù)準確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
巨(jù)球(qiú)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的結合及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成反應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保持很高的(dí)正確度。再通過選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高的靶基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應液加好後，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術概論。
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