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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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灰馬杜(dù)拉分(fēn)枝(zhī)菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé) |
Madurella griseaPCR |
YS-P014392 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期一般為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下，產物檢測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性與保守性(xìng)。
灰馬杜(dù)拉分枝菌PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區，其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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