產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
|
溶(róng)酪(lào)巨(jù)球(qiú)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Macrococcus caseolyticusPCR |
YS-P014391 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴增期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
溶酪(lào)巨球菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其中引物與模板(bǎn)的正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求低(dī)
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如血液，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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