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PCR檢測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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馬媾疫(yì)錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Trypanosoma equiperdumPCR |
YS-P014886 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現假陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與保守性。
馬媾疫錐蟲PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物與模板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴增的(dí)靶基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反應液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電泳分析，不一定要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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