產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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克氏(shì)錐蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Trypanosoma cruziPCR |
YS-P014885 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一次實驗中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復(fù)核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確引起的試劑檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與保(bǎo)守性。
克氏錐(zhuī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電泳分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要分離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
