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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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麻(má)疹(zhěn)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Measles VirusRTPCR |
YS-P014409 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效(xiào)期:一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性,有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實驗中同(tóng)時滿足,否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本(běn);對於可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī),則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng),否則判定為陰性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染,試(shì)劑汙(wū)染,樣品交叉(chā)汙染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引起的(dí)試(shì)劑檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
麻(má)疹(zhěn)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā),被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也就能保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因區,其特異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo);在病毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi));在(zài)細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次(cì)性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應,一(yī)般在2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細菌及培(péi)養細胞,DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標本如血液,體腔液,洗嗽液(yè),毛發,細胞,活PCR技術(shù)概(gài)論。
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