產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
|
擠奶(nǎi)工結節病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Milker's Nodule Virus(MNV)PCR |
YS-P014423 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議復核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
擠奶工(gōng)結節病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應中模板與引物的結合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性大大增加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳分析，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同位素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分離病毒或(huò)細菌及培養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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