產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
馬可(kě)尼小(xiǎo)囊(náng)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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馬(mǎ)可(kě)尼(ní)小囊蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Mikrocytos mackiniPCR |
YS-P014422 |
分類:PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存(cún),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光(guāng)。
有效期(qī):一(yī)年
貨期(qī):現貨PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年,這是指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú),否則該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本;對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一(yī)次,若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性;
3. 陰性:無(wú)指數擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸,保(bǎo)存不當或試劑(jì)配(pèi)製不準確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降,可(kě)能會導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結果。
②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性;
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
馬可尼小囊蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確結合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性,使反應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進行,結(jié)合的(dí)特異性大大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以指數方式增(zēng)加(jiā)的,能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞;在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位);在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不一定要用同(tóng)位素,無放(fàng)射性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液,體腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細(xì)胞(bāo),活PCR技(jì)術概論。
