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產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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非洲(zhōu)分(fēn)枝杆菌PCR檢測試劑(jì)盒 |
Mycobacterium africanumPCR |
YS-P014445 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次實驗(yàn)中同時滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異性與保守性。
非(fēi)洲分枝(zhī)杆菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與引物的結合(hé)(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數方式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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