產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
山(shān)羊支原體山羊(yáng)肺(fèi)炎(yán)亞(yà)種PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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山(shān)羊支原體山羊(yáng)肺炎亞(yà)種(zhǒng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Mycoplasma capricolum subsp. CapripneumoniaePCR |
YS-P014473 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保存,避免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期:一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年,這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛好超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足,否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可疑(yí):有明顯的指數擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣本建議復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī),則判定(dìng)為陽性,否(fǒu)則判定(dìng)為陰性;
3. 陰性(xìng):無指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試劑運輸,保存不(bù)當或(huò)試劑配製不準確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降,可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng);
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
山羊(yáng)支原體(tǐ)山(shān)羊肺炎亞種(zhǒng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行,結合(hé)的特異性大(dà)大增(zēng)加,被(bèi)擴增的靶基(jī)因片段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的,能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位);在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一(yī)般在(zài)2~4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析,不(bù)一定要用同(tóng)位素,無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術概論。
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