產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
|
差(chà)異支原體PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Mycoplasma disparPCR |
YS-P014474 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū):低(dī)溫,避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期,Ct值應小於等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú),否則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣本;對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì),若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期,則判定(dìng)為陽性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染,試劑汙染,樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當或(huò)試劑配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性(xìng);
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
差異支(zhī)原(yuán)體PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物與模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性,使反應中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大(dà)大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能保持很高(gāo)的正確度。再通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基因區(qū),其特異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模(mó)板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單位);在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu),即(jí)在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析,不一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無放射性(xìng)汙染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及培養細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔液,洗嗽液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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