產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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生殖(zhí)支(zhī)原體PCR檢測試劑(jì)盒 |
Mycoplasma genitaliumPCR |
YS-P014478 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保(bǎo)存,避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸:低溫,避光(guāng)。
有效期:一年(nián)
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指在適當的儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下,產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測結果應為陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同時(shí)滿足,否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
2.可疑(yí):有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn);對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核一次,若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染,試(shì)劑汙染,樣品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保存不當或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測效能下降,可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性與保(bǎo)守性。
生(shēng)殖(zhí)支原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合是關鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng),結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位);在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一次性地將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應,一般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不(bù)一定要用同位素(sù),無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度要求低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本如血(xiě)液,體腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛(máo)發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術概(gài)論。
- 上一條(tiáo):犬血支原體(tǐ)PCR檢測試劑盒
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