產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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皮(pí)諾(nuò)卡菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Nocardia farcinicaPCR |
YS-P014516 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫度下。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與(yǔ)保守性。
皮(pí)諾卡菌PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的結(jié)合(hé)及引物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大增加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和保守性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地將反應(yīng)液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同位素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及培養細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
