產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
新星諾(nuò)卡菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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新星諾(nuò)卡菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Nocardia novaPCR |
YS-P014517 |
分類:PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為1年,這(zhè)是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則該次(cì)實驗視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本;對於(yú)可疑樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核(hé)一次,若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則(zé)判定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng),可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假陰(yīn)性結果。
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性與保守性。
新星諾卡菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進(jìn)行(háng),結合的特(tè)異性大(dà)大增加(jiā),被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因區,其特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出(chū)一個靶細(xì)胞;在病毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位);在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加好後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般(bān)在(zài)2~4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析,不一定要(yào)用(yòng)同位素(sù),無放(fàng)射性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本如血液,體腔液,洗嗽液(yè),毛發(fā),細胞,活PCR技術概(gài)論。
