產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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皺褶(zhě)青黴(méi)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Penicillium rugulosumPCR |
YS-P014578 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保存,避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸:低溫,避光(guāng)。
有效期(qī):一年
貨期:現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年,這(zhè)是指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高點。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性,有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35;
3. 以上要求(qiú)需在一次實(shí)驗中同時滿足(zú),否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本(běn);對(duì)於可疑(yí)樣本建議復核一次(cì),若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現假陽(yáng)性結果(guǒ);
2. 試劑運輸,保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降(jiàng),可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶基因的特異(yì)性(xìng)與保守性。
皺褶青黴(méi)PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下進行,結合的特異性大大增(zēng)加,被(bèi)擴增的靶基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其特(tè)異性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病毒的(dí)檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單位);在(zài)細菌學中zui小檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分析(xī),不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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