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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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消化(huà)鏈球菌通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Peptostreptococcus spp.PCR |
YS-P014583 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這是指在適(shì)當的儲存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫設定在剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
消(xiāo)化(huà)鏈球菌通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基(jī)配對原則的(dí)。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復性(xìng))可以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
