產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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海(hǎi)水派琴蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
Perkinsus marinusPCR |
YS-P014584 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否則(zé)該次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會出現假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引起的試劑檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性與保守性。
海(hǎi)水派琴(qín)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性大大增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性和保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指數方式增(zēng)加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
