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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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奧爾(ěr)森(sēn)派(pài)琴蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Perkinsus olseniPCR |
YS-P014585 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保守性。
奧爾森派(pài)琴蟲PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與模板的正確(què)結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以在較高的(dí)溫度下進行，結合的特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用電泳分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概(gài)論。
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