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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
巨睾(gāo)前(qián)殖(zhí)吸蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
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巨睾前殖吸(xī)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Prosthogonimus macrorchisPCR |
YS-P014636 |
分類:PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條件:-20℃避(bì)光保存,避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期:一年(nián)
貨期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為1年,這是指在適當的(dí)儲存溫度下。核酸擴增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期,Ct值應(yīng)小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時滿足,否(fǒu)則(zé)該次實驗視為無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì),若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數擴增期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙(wū)染,樣品(pǐn)交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng),可(kě)能會導致出(chū)現假陰性(xìng)結果。
②鹼基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
巨(jù)睾(gāo)前(qián)殖吸(xī)蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行,結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增加,被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守(shǒu)性高的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞;在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位);在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後,即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應,一(yī)般(bān)在2~4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析,不(bù)一定要用(yòng)同位素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞,DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗嗽(sòu)液,毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技術概論。
