產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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裏氏(shì)立克(kè)次氏體PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Rickettsia risticiiPCR |
YS-P014685 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次實(shí)驗中同時滿足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議復核一次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
裏氏立克(kè)次(cì)氏體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片段也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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