產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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雞(jī)傷(shāng)寒沙門(mén)氏菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Salmonella gallinarumPCR |
YS-P014706 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試(shì)劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
雞(jī)傷寒(hán)沙(shā)門氏菌PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以(yǐ)指數方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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