產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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火雞(jī)支(zhī)原體(tǐ)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Mycoplasma meleagridisPCR |
YS-P014485 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年(nián),這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng),有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應小於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú),否則該次實驗(yàn)視為無效。
2.可疑(yí):有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn);對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一次,若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則判定為陽性,否則判定為陰(yīn)性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣品交叉汙染(rǎn)會出現假陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與保守性。
火(huǒ)雞(jī)支原(yuán)體(tǐ)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基(jī)配對原則的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下進行,結(jié)合(hé)的特異性大大增加(jiā),被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區,其(qí)特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的,能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒的檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位);在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應,一般(bān)在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不一定要用同(tóng)位素(sù),無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低
不需要分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論(lùn)。
- 上一(yī)條(tiáo):絲狀支原(yuán)體(tǐ)簇(cù)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
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