產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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絲狀(zhuàng)支原(yuán)體簇PCR檢測(cè)試劑盒 |
Mycoplasma mycoides clusterPCR |
YS-P014486 |
分類:PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避(bì)免反復凍融。
運輸:低溫,避光。
有(yǒu)效期:一年(nián)
貨(huò)期:現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年,這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結果應為(wéi)陽性,有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī),Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng),否則判(pàn)定(dìng)為陰性;
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴增期(qī),Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙染,樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降,可能會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
絲(sī)狀(zhuàng)支原(yuán)體簇PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性,使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進(jìn)行,結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大(dà)增加,被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加好後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應,一般(bān)在2~4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用電泳分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素,無(wú)放射性汙染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血(xiě)液,體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技術概(gài)論。
- 上(shàng)一條(tiáo):絲狀(zhuàng)支原(yuán)體絲(sī)狀亞種型PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
- 下(xià)一條:火(huǒ)雞(jī)支(zhī)原(yuán)體PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
