產(chǎn)品中心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號(hào) |
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札如(rú)病毒型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Sappovirus(SV)G2RTPCR |
YS-P014723 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸:低溫,避光(guāng)。
有效期:一年(nián)
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī),Ct值應(yīng)小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú),否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次,若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試劑汙染,樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確引起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降,可(kě)能會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
札如病毒型PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進行,結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā),被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶基因區(qū),其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的,能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶,一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu),即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應,一般(bān)在(zài)2~4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般用電(diàn)泳分析,不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放射性(xìng)汙(wū)染,易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不需要分離病毒或細菌及培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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