產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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誌賀氏(shì)菌(jūn)屬(shǔ)通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Shigella spp.PCR |
YS-P014749 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期(qī)，則判定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試劑檢測效能下降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
誌賀氏(shì)菌屬通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高的正確度。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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