產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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白鱘虹(hóng)彩病(bìng)毒PCR檢測試劑盒 |
Shovenose Sturgeon Iridovirus(SSIV)PCR |
YS-P014750 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保守(shǒu)性(xìng)。
白鱘(xún)虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒其中引物(wù)與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的結合(hé)及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性大大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
