產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
|
偽(wěi)中間(jiān)型葡萄球菌(jūn)PCR檢測試劑盒 |
Staphylococcus pseudintermediusPCR |
YS-P014775 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議復核(hé)一(yī)次，若復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保守性。
偽中間型葡萄球菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量是以指數方(fāng)式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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