產品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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尼泊爾(ěr)葡萄(táo)球(qiú)菌PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Staphylococcus nepalensisPCR |
YS-P014774 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配製不準確引起的試劑檢測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保守性。
尼(ní)泊爾(ěr)葡(pú)萄球(qiú)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與模(mó)板的正確結合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的(dí)結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論。
