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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)

變異鏈球(qiú)菌PCR檢測試劑(jì)盒

文字:[大(dà)][中(zhōng)][小] 2024-3-18    瀏覽次數:691    
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
產品名稱 英文名稱 貨(huò)號(hào)
變(biàn)異鏈(liàn)球菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
Streptococcus mutansPCR
YS-P014788
規格:50T
分類:PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保存,避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī):一(yī)年

貨期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下,產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。


【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 基(jī)綫(Baseline)設定(dìng):應選(xuǎn)擇(zé)該次實驗指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)前所(suǒ)有樣本熒光(guāng)信(xìn)號比(bǐ)較(jiào)穩(wěn)定的(dí)一(yī)段(duàn)區(qū)域(yù)(所有樣本(běn)熒(yíng)光信號無(wú)較大波動(dòng)),起始點(Start)應避開熒光采(cǎi)集(jí)起始(shǐ)階段的信(xìn)號波動(dòng),終(zhōng)止點(End)應比最早(zǎo)出現(xiàn)指數(shù)擴增的(dí)樣(yàng)本Ct值減少1~3個循環(huán),建議(yì)基綫設為6~15。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
1.   陰(yīn)性質控品(pǐn)的檢測(cè)結果應為陰性,無指數擴增期(qī),Ct=40或無Ct;
2.   陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於等於35;
3.   以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足,否則該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
1.   陽性:有明(míng)顯的指數(shù)擴增期,且(qiě)Ct<38;
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本;對於(yú)可疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次(cì),若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定為陽性,否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng);
3.   陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1.   實驗室環(huán)境汙染,試劑汙染,樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);

2.   試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保存不當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降,可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。


PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性:
   ①引物與(yǔ)模(mó)板DNA特(tè)異(yì)正確(què)的結合;
   ②鹼基配對(duì)原則(zé);
   ③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
   ④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守性。
口腔(qiāng)鏈球(qiú)菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的結(jié)合及引物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進行,結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能保持很(hěn)高的正確度。再(zài)通過選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū),其特異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞;在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素,無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液,體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發,細(xì)胞(bāo),活PCR技(jì)術概論(lùn)。

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