產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
|
唾(tuò)液(yè)鏈球菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Streptococcus salivarius PCR |
YS-P014790 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸擴增部分的(dí)試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導致出(chū)現假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
唾液鏈球(qiú)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進行(háng)，結(jié)合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基因片(piàn)段也就能(néng)保持很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方式增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
