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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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乳房(fáng)鏈(liàn)球菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Streptococcus uberisPCR |
YS-P014796 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過正常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結果Ct<40且有指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
乳房(fáng)鏈球(qiú)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反應中模板與(yǔ)引物的結合(復性(xìng))可以在較高的溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保(bǎo)持很高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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