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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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布氏(shì)錐尾綫蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Subulura brumptiPCR |
YS-P014806 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求需在一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣本建議(yì)復核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守(shǒu)性。
布氏錐(zhuī)尾綫蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應中模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選擇特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不需要分離病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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