產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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豬(zhū)痘病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Swine Poxvirus（SWPV）PCR |
YS-P014811 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本建議復核一次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
豬痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正確結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反應。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分離病毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
