產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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塔(tǎ)卡裏伯(bó)病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
Tacaribe Virus(TCRV)RTPCR |
YS-P014814 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或試劑(jì)配製不準確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
塔(tǎ)卡裏伯病(bìng)毒PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物的結合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較高的溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基(jī)因(yīn)片段也就能保持很(hěn)高的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地將反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要用(yòng)同位素，無放射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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