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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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泰勒(lè)氏菌通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Taylorella spp.PCR |
YS-P014825 |
分類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測(cè)效能(néng)下降，可能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
泰勒氏(shì)菌(jūn)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特異性大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量是以指數方式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標本如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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