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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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鄉土旋毛蟲PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Trichinella nativaPCR |
YS-P014853 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不(bù)當或(huò)試劑配製不(bù)準確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守(shǒu)性(xìng)。
鄉(xiāng)土旋(xuán)毛蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因片段也就(jiù)能保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守性高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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