產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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米(mǐ)氏旋毛(máo)蟲(chóng)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Trichinella murrelliPCR |
YS-P014852 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以上要求需在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判定為陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
米氏(shì)旋(xuán)毛(máo)蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式(shì)增加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞；在病毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析(xī)，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要分(fēn)離病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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