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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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亮熱(rè)厲蟎PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Tropiladaps clareaePCR |
YS-P014879 |
分類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存,避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸:低溫,避光。
有(yǒu)效期:一年
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一般為1年,這是指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct值應小於等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú),否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本;對於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次(cì),若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙(wū)染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng),可能會(huì)導致出現假陰性結果。

②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性。
亮熱厲(lì)蟎(mǎn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫度下(xià)進行,結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區,其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以(yǐ)指數方式增加的,能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位);在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後(hòu),即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一般在2~4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位素,無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培養細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔液(yè),洗嗽液(yè),毛發,細胞,活PCR技術概論(lùn)。
