產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
|
錐蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Trypanosoma spp.PCR |
YS-P014889 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則該次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
錐蟲通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物與模板的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物的結合(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電泳分(fēn)析，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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