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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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猿(yuán)猴錐(zhuī)蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Trypanosoma simiaePCR |
YS-P014888 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不(bù)當或試(shì)劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
猿猴錐蟲PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行，結合的特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基(jī)因區，其特(tè)異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求低
不(bù)需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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