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產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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委內瑞(ruì)拉馬(mǎ)腦脊髓(suǐ)炎病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Venezuelan Equine Encephalomyelitis Virus(VEEV)RTPCR |
YS-P014903 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會出現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試劑配製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
委(wěi)內瑞(ruì)拉馬腦脊(jǐ)髓(suǐ)炎病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特(tè)異性大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一(yī)般在2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論。
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