產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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豬(zhū)水皰疹(zhěn)病毒PCR檢測試劑盒 |
Vesicular Exanthema of Swine Virus (VESV)RTPCR |
YS-P014904 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避光(guāng)。
有效(xiào)期:一年
貨期:現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年,這是(shì)指在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽性,有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實(shí)驗中同時滿足(zú),否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性,否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染,試劑(jì)汙染,樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降,可能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。

②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
豬水皰(pào)疹(zhěn)病(bìng)毒PCR檢測試劑盒其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的溫度下進行(háng),結合的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高的正確度(dù)。再通過選擇(zé)特異性和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區,其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式(shì)增加的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞;在(zài)病毒(dú)的檢測中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位);在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用電泳分(fēn)析(xī),不(bù)一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn),易推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需要分離病毒(dú)或細菌及(jí)培養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如血液,體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論。
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