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產品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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水泡性口炎病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Vesicular Stomatitis Virus(VSV)RTPCR |
YS-P014905 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測結果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建議復核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致出(chū)現假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
水泡性口(kǒu)炎(yán)病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結合是關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進行(háng)，結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區，其特異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用電泳分析，不一定要用同位素，無放(fàng)射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要求低
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概論。
- 上一(yī)條：坎(kǎn)氏(shì)弧菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒
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